概述：甜美素是食物出产中常用的甜味增添剂，其甜度是蔗糖的30～40倍,节制限量对人们的身材安康有首要意思。《GB 2760-2014 食物增添剂利用规范》顶用于界定食物增添剂利用规模的食物分类体系，白酒属于蒸馏酒，不许可利用甜美素。本体例参照GB/T 5009.97-2003及相干文献资料，对白酒中的甜美素经提取后，在冰浴前提下，与亚硝酸钠产生重氮化反映天生衍生物环己醇亚硝酸酯，衍生物进入气相色谱质谱联用仪停止分手检测。
1 尝试局部
1.1 仪器与试剂
江(jiang)苏天瑞仪(yi)器股分无限(xian)公(🍰gong)司气相色谱-质谱联(lian)用(yong)仪(yi)：GC-MS 6800
🃏
甜美素规范储蓄溶液：称取必然量的甜美素规范品（纯度为99.0％）于枯燥容量瓶中，用水配成1000mｇ/kg规范储蓄溶液。
试剂均为优级纯，尝试用水为二次蒸馏水。
1.2 仪器任务前提
1.2.1
气相色谱前提
DB-5毛细管色谱（30m ×0.25mm,0.25um）；载气：氦气（纯度为99.999％），载气流量1.0mL/min；进样口温度250℃，进样量1.0uL，进样体例为分流进样,分流比10:1；法式升温：初始温度为40℃，坚持时候10min，以25℃/min速度升至270℃，坚持时候5min。
1.2.2
质谱前提
电子轰击离子源（EI），四级杆温度150℃，接口温度280℃；收罗体例为挑选离子监测扫描（SIM），溶剂提早时候6min,挑选3个监测离子质荷比（m/z）为55,81,83。
1.3 尝试体例（略）
2 成果与会商
2.1 特点和离子的挑选
甜(tian)美素的首要衍生物环己醇亚硝酸酯(zhi)作(zuo)为定(ding)性和定(ding)量(liang)，如图1。保留时候8.511min.定(di🌃ng)性离子（m/z）为55,81,83。定(ding)量(liang)离子为55。质谱图见(jian)图2.
图1、柔美素双重性物在总阴离子流色谱图
F🥀igure 1、 Cyclamate derivatives total ion
chromatogram
图(tu)2、清甜素具象化物的质谱图(tu)
Figure 2、 Cyclamate derivative spectrum
图3🌳、柔美素并衍生物(wu)在SIM扫描拍摄下的铝(lvꦉ)离子流色(se)谱图
Figure 3、 Cy🐼clamate
derivative SIM under scanning ion chromatogram
图4、甜(tian)甜(tian)的(de)素🍃诞生物(wu)在SIM检测(ce)下的(de)质(zhi)谱(pu)图
Figure 4、 Cyclamate derivative 🦋SIM
under scanning spectrum
2.2 前处置前提挑选
2.2.1 发展的时候挑
精确吸收的1ml甜美素储蓄液溶液根据上述衍生步骤停止衍生化，甜美素衍生物浓度为200ug/mL，衍生反映时候别离设置为10min、20min、30min、40min、50min，考查反映时候对反映的影响。成果标明，跟着时候从10min升至30min，衍生物旌旗灯号呼应值逐步增添，跟着反映时候的耽误，呼应值反而呈现下降，是以，衍生反映温度30min最好。
2.2.2
硫酸浓度的挑选
精确吸收的1mL甜美素储蓄液溶液根据上述衍生步骤停止衍生化，甜美素衍生物浓度为200ug/mL，冰浴反映前提下，插手50g/L的亚硝酸钠和别离为50g/L，75g/L，100g/L，125g/L，150g/L。成果标明，酸度从50g/L至100g/L，反映衍生物旌旗灯号呼应值较着增添，浓度降低时，呼应值呈现削减，是以，终究衍生反映酸度为100g/L。
2.2.3 亚硝酸钠浓度对衍生反映的影响
精确吸收的1ml甜美素储蓄液溶液根据上述衍生步骤停止衍生化衍生化，甜美素衍生物浓度为200ug/mL，冰浴反映前提下，插手100g/L的硫酸，和别离为30g/L，50g/L，70g/L，90g/L亚硝酸钠。成果标明，酸度从30g/L至50g/L，反映衍生物旌旗灯号呼应值较着增添，浓度降低时，呼应值呈现削减，是以，终究亚硝酸钠衍生反映为50g/L。
3 尝试数据
3.1 精密度和反复性尝试
精确移取储(chu)蓄液500uL于离心(xin)管中(zhong)，用(yong)水定容20mL根据上述标样衍生(sheng)(sheng)步(bu)骤停止衍生(sheng)(sheng)化，衍生(sheng)(sheng)物(wu)浓度为(wei)100ug/mL，平行制备反(fan)映(ying)液6次，用(yong)GC-MS测定。考查衍生(sheng)(sheng)体例的(de)重现性和组分保留(liu)时(shi)候和峰面积(ji)的(de)绝对规(gui)范𝕴误差(cha)，6个平行样的(de)谱(pu)。成(cheng)果标明，保留(liu)时(shi)候RSD为(wei)0.98%，峰面积(ji)RSD为(wei)6.00%,，具(ju)体尝试(shi)数(shu)据以(yi)下表1所示 。
表1、反反复复性测试测试成果展
Table 1, repeatable test results
|
样件微章
|
调取是
|
永久保存情况下(xia)RSD%
|
峰平数
|
峰使用(yong)面(mian)积RSD%
|
|
1
|
8.611
|
0.98%
|
96798
|
6.00%
|
|
2
|
8.518
|
99549
|
|
3
|
8.406
|
105518
|
|
4
|
8.431
|
99798
|
|
5
|
8.411
|
87708
|
|
6
|
8.410
|
96500
|
3.2 线性干系和检测限
精确吸收浓度为10ug/mL的甜美素规范溶液10ul于50ml离心管中对应衍生物浓度别离为2ug/mL、10ug/mL、20ug/mL、100ug/mL、200ug/mL，根据上述标样衍生化步骤停止衍生化，停止线性测试。尝试所得线性方程为：y=940.43x-3525.57，线性相干系数为0.9984，如图5所示。
图5. 线性干系图
Figure 5，Linear
3.3 收受接管率测试
挑选2mg/kg、50mg/kg、200mg/kg的标样增添浓度，对某品牌白酒停止收受接管率尝试，每一个浓度别离做三次平行样，按处置样品的体例处置加标后的样品并测试，接纳外标法定量，测试成果以下表2所示。
|
质量浓(nong)度/mg/kg
|
收受收回率(lv)1/%
|
收受移交率(lv)2/%
|
收受打压率(lv)3/%
|
平(ping)滑收(shou)受(shou)对接率/%
|
|
2
|
109.6
|
104.7
|
107.7
|
107.3
|
|
50
|
99.84
|
113.7
|
103.5
|
105.7
|
|
200
|
108.3
|
114.9
|
116.7
|
113.3
|
表2、收受接管率测试成果
Table 2, the recovery test results
3.4 现实样品测试
根(gen)据上述样(yang)品处置(zhi)体例(li)对差别品类的白酒样𝓰(yang)品停止(zhi)前处置(zhi)和(he)衍(yan)生化，利用GC-MS6800停止(zhi)测试(shi)，测试(shi🧸)成果(guo)以下表3所示(shi)：
|
合格品
|
柔(rou)美素(su)含氧量(liang)/mg/kg
|
|
酒打样(yang)定制1
|
N.D.
|
|
酒(jiu)产(chan)品的样品2
|
N.D.
|
|
酒(jiu)样板(ban)3
|
N.D.
|
|
酒(jiu)产品的样品4
|
N.D.
|
|
酒土样5
|
N.D.
|
注：“N.D”表现“未检出”
表3.、酒中甜美素含量测试成果
4 论断
本尝试接纳GCMS-6800，在SIM扫描形式下对酒中的甜美素停止测试和阐发，体例不变靠得住，线性规模好，活络度高，受杂质峰的搅扰小，可以或许有用地对酒中的甜美素停止定性定量阐发。
